96T大鼠Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原(KL6)ELISA試劑盒組成：  微孔酶標(biāo)板 12 孔×8 條； 標(biāo)準(zhǔn)品 0.3mL*6 管 ；本稀釋液 6mL；檢測(cè)抗體-HRP 10mL；20×洗滌緩沖液 25mL （按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋 ）；底物 A 6mL ；底物 B 6mL；終止液 6mL ；封板膜 2 張 ；說(shuō)明書(shū) 1 份 ；自封袋 1 。

檢測(cè)原理：大鼠Elisa試劑盒大多采用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定樣品指標(biāo)水平，檢測(cè)的樣品主要是包括血清、血漿或者是各種組織液中的固體組織等，用純化的抗體微孔板，制成固體相抗體，再依次加入樣品，與所標(biāo)記好的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)結(jié)合物，再加相應(yīng)的酶底物進(jìn)行顏色反應(yīng)。最后用酶標(biāo)儀在相應(yīng)的波長(zhǎng)下測(cè)定該成份的吸光度，并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中的濃度。與規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值比較，從而來(lái)判定樣品標(biāo)本的特性。

操作注意事項(xiàng)：

1.  試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。

2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3.  濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白；按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍，最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。

4.  嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

大鼠Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原(KL6)ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題解析：

1. 【標(biāo)準(zhǔn)曲線差問(wèn)題】

解決方案：檢查并校正移液器避免移液不準(zhǔn)確；按說(shuō)明書(shū)要求充分洗滌和浸泡；充分混勻和吸取試劑；進(jìn)行正確的標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋。

2. 【精密度低問(wèn)題】

解決方案：重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜易造成這個(gè)問(wèn)題，建議更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜。同時(shí)加樣、溫育也十分重要。建議校正移液器精確的加入試劑，根據(jù)說(shuō)明書(shū)的要求保證充足的溫育時(shí)間。

3. 【OD值低問(wèn)題】

解決方法：正確的儲(chǔ)存樣本，使用新鮮樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，通過(guò)混合酶標(biāo)記物和底物顏色應(yīng)迅速顯現(xiàn)來(lái)檢查。按照說(shuō)明推薦的讀數(shù)時(shí)間內(nèi)讀數(shù)。

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